更新時間：2024-11-23
Y190 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50菌株一種常用于質(zhì)粒克隆的菌株。其φ80lacZΔM15基因的產(chǎn)物可與pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)a互補(bǔ)，可用于藍(lán)白斑篩選。recA1和endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。
Y190 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50以下是的訂購信息儲存條件：-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化，處于冰水混合狀態(tài)時插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA（轉(zhuǎn)化效率較高，*次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量），用手管底混勻，依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
3. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基，于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時。
Y190 感受態(tài)細(xì)胞100ul*504. 6000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
注意事項(xiàng)
1. 加入質(zhì)粒時體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10；質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機(jī)物污染，轉(zhuǎn)化效率急劇下降；質(zhì)粒增大一倍，轉(zhuǎn)化效率下降一個數(shù)量級。
2. 混入質(zhì)粒時應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?？上鄳?yīng)減少終用于涂板的菌量。
Y190 感受態(tài)細(xì)胞100ul*503. 平板上陽性克隆密度過大時，由于營養(yǎng)不足，陽性克隆生長變慢，菌落變小，為了獲得大的菌落，應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml，過高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長，會降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計(jì)算轉(zhuǎn)化效率時所用平板只含有50 μg/ml kan，若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長、篩選農(nóng)桿菌；根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失，但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作，所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時不考慮這些抗生素，Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。
IMA 人缺血修飾白蛋白 規(guī)格： 48T/96T
ALD 人醛縮酶 規(guī)格： 48T/96T
ALD 人醛固酮 規(guī)格： 48T/96T
i-PTH 人全段甲狀旁腺素 規(guī)格： 48T/96T
ASGPR 人去唾液酸糖蛋白受體 規(guī)格： 48T/96T
NA 人 規(guī)格： 48T/96T
FK 人趨化因子 規(guī)格： 48T/96T
SRB/CD36 人清道夫受體B 規(guī)格： 48T/96T
SM 人鞘磷脂 規(guī)格： 48T/96T
Dsg-1 人橋粒芯糖蛋白-1 規(guī)格： 48T/96T
Hyl 人羥賴氨酸 規(guī)格： 48T/96T
OH-PYD 人羥基膠原吡啶交聯(lián) 規(guī)格： 48T/96T
HRGP 人羥糖蛋白 規(guī)格： 48T/96T
Hyp 人羥 規(guī)格： 48T/96T
Dyn 人強(qiáng)啡肽 規(guī)格： 48T/96T
LMP-1 人潛伏膜蛋白1 規(guī)格： 48T/96T
Pro-ANP 人前心鈉肽 規(guī)格： 48T/96T
Pro-ANP 人前心鈉肽 規(guī)格： 48T/96T
PSA 人前列腺特異性抗原 規(guī)格： 48T/96T
PAP 人前列腺酸性磷酸酶 規(guī)格： 48T/96T
PGF 人前列腺素F 規(guī)格： 48T/96T
PGE2 人前列腺素E2 規(guī)格： 48T/96T
PGE1 人前列腺素E1 規(guī)格： 48T/96T
PTGDS 人前列腺素D合成酶 規(guī)格： 48T/96T
PGDS 人前列腺素D合成酶 規(guī)格： 48T/96T
PGI 人前列環(huán)素 規(guī)格： 48T/96T
PCP 人前膠原C端肽酶 規(guī)格： 48T/96T
PA 人前白蛋白 規(guī)格： 48T/96T
CALLA 人普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原 規(guī)格： 48T/96T
GLUT3 人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3 規(guī)格： 48T/96T
GLUT1 人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1 規(guī)格： 48T/96T
GIP 人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽 規(guī)格： 48T/96T
GOD 人葡萄糖氧化酶 規(guī)格： 48T/96T
GKRP 人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白 規(guī)格： 48T/96T
GCK 人葡萄糖激酶 規(guī)格： 48T/96T
Y190 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50 GPI 人葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶 規(guī)格： 48T/96T
SPA 人葡萄球菌蛋白A 規(guī)格： 48T/96T
Tetanus Ab 人破傷風(fēng)抗體 規(guī)格： 48T/96T
ODF 人破骨細(xì)胞分化因子 規(guī)格： 48T/96T
Prednisolone 人龍 規(guī)格： 48T/96T
SMM 人平滑肌肌球蛋白 規(guī)格： 48T/96T
Syk 人脾臟激酶 規(guī)格： 48T/96T
021-57763112
86-021-57690166
